অণুবীক্ষণিক গবেষণা পদ্ধতি হল বিশেষ যন্ত্রপাতি ব্যবহার করে বিভিন্ন বস্তুর অধ্যয়ন করার পদ্ধতি। এটি আমাদের পদার্থ এবং জীবের গঠন বিবেচনা করতে দেয়, যার মাত্রা মানুষের চোখের রেজোলিউশনের বাইরে। নিবন্ধে, আমরা সংক্ষিপ্তভাবে মাইক্রোস্কোপিক গবেষণা পদ্ধতি বিশ্লেষণ করব৷
সাধারণ তথ্য
আণুবীক্ষণিক পরীক্ষার আধুনিক পদ্ধতি বিভিন্ন বিশেষজ্ঞরা তাদের অনুশীলনে ব্যবহার করেন। তাদের মধ্যে virologists, cytologists, hematologists, morphologists এবং অন্যান্যরা রয়েছেন। মাইক্রোস্কোপিক পরীক্ষার প্রধান পদ্ধতিগুলি দীর্ঘকাল ধরে পরিচিত। প্রথমত, এটি বস্তু দেখার একটি হালকা পদ্ধতি। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, অন্যান্য প্রযুক্তিগুলি সক্রিয়ভাবে অনুশীলনে চালু করা হয়েছে। এইভাবে, ফেজ-কনট্রাস্ট, লুমিনেসেন্ট, হস্তক্ষেপ, মেরুকরণ, ইনফ্রারেড, অতিবেগুনী, স্টেরিওস্কোপিক গবেষণা পদ্ধতি জনপ্রিয়তা অর্জন করেছে। তাদের সব বিভিন্ন বৈশিষ্ট্য উপর ভিত্তি করে.স্বেতা। উপরন্তু, ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপিক গবেষণা পদ্ধতি ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। এই পদ্ধতিগুলি আপনাকে চার্জযুক্ত কণাগুলির একটি নির্দেশিত প্রবাহ ব্যবহার করে বস্তুগুলি প্রদর্শন করতে দেয়। এটি লক্ষ করা উচিত যে অধ্যয়নের এই জাতীয় পদ্ধতিগুলি কেবল জীববিজ্ঞান এবং ওষুধেই ব্যবহৃত হয় না। শিল্পে ধাতু এবং সংকর অধ্যয়নের মাইক্রোস্কোপিক পদ্ধতিটি বেশ জনপ্রিয়। এই ধরনের একটি অধ্যয়ন জয়েন্টগুলির আচরণের মূল্যায়ন করা, ব্যর্থতার সম্ভাবনা কমাতে এবং শক্তি বাড়ানোর জন্য প্রযুক্তি বিকাশ করা সম্ভব করে তোলে৷
হালকা উপায়: বৈশিষ্ট্য
অণুজীব এবং অন্যান্য বস্তু অধ্যয়নের জন্য এই ধরনের অণুবীক্ষণিক পদ্ধতিগুলি সরঞ্জামের বিভিন্ন রেজোলিউশনের উপর ভিত্তি করে। এই ক্ষেত্রে গুরুত্বপূর্ণ কারণগুলি হল মরীচির দিক, বস্তুর নিজস্ব বৈশিষ্ট্য। পরেরটি, বিশেষ করে, স্বচ্ছ বা অস্বচ্ছ হতে পারে। বস্তুর বৈশিষ্ট্য অনুসারে, আলোক প্রবাহের ভৌত বৈশিষ্ট্যগুলি পরিবর্তিত হয় - উজ্জ্বলতা এবং রঙ, প্রশস্ততা এবং তরঙ্গদৈর্ঘ্য, সমতল, ফেজ এবং তরঙ্গ প্রচারের দিকনির্দেশের কারণে। বিভিন্ন মাইক্রোস্কোপিক গবেষণা পদ্ধতি এই বৈশিষ্ট্যগুলির ব্যবহারের উপর ভিত্তি করে।
নির্দিষ্ট
আলো পদ্ধতিতে অধ্যয়নের জন্য, বস্তুগুলি সাধারণত আঁকা হয়। এটি আপনাকে তাদের নির্দিষ্ট বৈশিষ্ট্যগুলি সনাক্ত করতে এবং বর্ণনা করতে দেয়। এর জন্য টিস্যুগুলিকে স্থির করা প্রয়োজন, যেহেতু দাগ শুধুমাত্র নিহত কোষগুলিতে নির্দিষ্ট কাঠামো প্রকাশ করবে। জীবন্ত কোষে, ডাই সাইটোপ্লাজমে ভ্যাকুয়াল হিসাবে বিচ্ছিন্ন হয়। এটা কাঠামো আঁকা না. কিন্তু হালকা অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সাহায্যে জীবন্ত বস্তুও পরীক্ষা করা যায়।এই জন্য, অধ্যয়নের একটি গুরুত্বপূর্ণ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়। এই ধরনের ক্ষেত্রে, একটি অন্ধকার-ক্ষেত্র কনডেন্সার ব্যবহার করা হয়। এটি একটি হালকা মাইক্রোস্কোপে তৈরি করা হয়েছে৷
আঁকাবিহীন বস্তু অধ্যয়ন
এটি ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে করা হয়। এই পদ্ধতিটি বস্তুর বৈশিষ্ট্য অনুসারে মরীচির বিচ্ছুরণের উপর ভিত্তি করে। এক্সপোজার প্রক্রিয়ায়, ফেজ এবং তরঙ্গদৈর্ঘ্যের একটি পরিবর্তন লক্ষ্য করা যায়। মাইক্রোস্কোপ উদ্দেশ্য একটি স্বচ্ছ প্লেট আছে. জীবিত বা স্থির, কিন্তু রঙিন বস্তু নয়, তাদের স্বচ্ছতার কারণে, প্রায় তাদের মধ্য দিয়ে যাওয়া মরীচির রঙ এবং প্রশস্ততা পরিবর্তন করে না, যা তরঙ্গ পর্যায়ে কেবল একটি পরিবর্তনকে উস্কে দেয়। কিন্তু একই সময়ে, বস্তুর মধ্য দিয়ে যাওয়ার পরে, হালকা প্রবাহ প্লেট থেকে বিচ্যুত হয়। ফলস্বরূপ, বস্তুর মধ্য দিয়ে যাওয়া রশ্মি এবং আলোর পটভূমিতে প্রবেশ করার মধ্যে, তরঙ্গের দৈর্ঘ্যের একটি পার্থক্য দেখা যায়। একটি নির্দিষ্ট মান এ, একটি চাক্ষুষ প্রভাব ঘটে - একটি অন্ধকার বস্তু একটি হালকা ব্যাকগ্রাউন্ডের বিরুদ্ধে স্পষ্টভাবে দৃশ্যমান হবে, বা বিপরীতভাবে (ফেজ প্লেটের বৈশিষ্ট্য অনুসারে)। এটি পেতে, পার্থক্যটি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের কমপক্ষে 1/4 হতে হবে।
অপট্রাল পদ্ধতি
এটি এক ধরনের ফেজ-কনট্রাস্ট পদ্ধতি। অ্যানোপট্রাল পদ্ধতিতে বিশেষ প্লেট সহ একটি লেন্স ব্যবহার করা জড়িত যা শুধুমাত্র পটভূমির আলোর রঙ এবং উজ্জ্বলতা পরিবর্তন করে। এটি রংবিহীন জীবন্ত বস্তু অধ্যয়নের সম্ভাবনাকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রসারিত করে। গবেষণার ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপিক পদ্ধতি মাইক্রোবায়োলজি, প্যারাসিটোলজিতে উদ্ভিদ ও প্রাণী কোষের গবেষণায় ব্যবহৃত হয়,সহজতম জীব। হেমাটোলজিতে, এই পদ্ধতিটি রক্ত এবং অস্থি মজ্জার উপাদানগুলির পার্থক্য গণনা এবং নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়।
হস্তক্ষেপ কৌশল
এই মাইক্রোস্কোপিক গবেষণা পদ্ধতিগুলি সাধারণত ফেজ-কনট্রাস্টগুলির মতো একই সমস্যাগুলি সমাধান করে। যাইহোক, পরবর্তী ক্ষেত্রে, বিশেষজ্ঞরা শুধুমাত্র বস্তুর রূপরেখা পর্যবেক্ষণ করতে পারেন। হস্তক্ষেপ মাইক্রোস্কোপিক গবেষণা পদ্ধতি আপনাকে উপাদানগুলির পরিমাণগত মূল্যায়ন করতে, তাদের অংশগুলি অধ্যয়ন করতে দেয়। আলোর রশ্মির বিভাজনের কারণে এটি সম্ভব। একটি প্রবাহ বস্তুর কণার মধ্য দিয়ে যায় এবং অন্যটি যায়। একটি মাইক্রোস্কোপের আইপিসে, তারা একত্রিত হয় এবং হস্তক্ষেপ করে। ফলস্বরূপ ফেজ পার্থক্য বিভিন্ন সেলুলার কাঠামোর ভর দ্বারা নির্ধারণ করা যেতে পারে। প্রদত্ত প্রতিসরণ সূচকগুলির সাহায্যে এটিকে পর্যায়ক্রমে পরিমাপ করে, অ-স্থির টিস্যু এবং জীবন্ত বস্তুর পুরুত্ব, তাদের মধ্যে প্রোটিনের পরিমাণ, শুষ্ক পদার্থ এবং জলের ঘনত্ব ইত্যাদি নির্ধারণ করা সম্ভব। প্রাপ্ত তথ্য অনুসারে, বিশেষজ্ঞরা পরোক্ষভাবে ঝিল্লি ব্যাপ্তিযোগ্যতা, এনজাইম কার্যকলাপ, এবং সেলুলার বিপাক মূল্যায়ন করতে সক্ষম।
মেরুকরণ
এটি নিকোল প্রিজম বা ফিল্মি পোলারয়েড ব্যবহার করে করা হয়। এগুলি ওষুধ এবং আলোর উত্সের মধ্যে স্থাপন করা হয়। অণুজীববিজ্ঞানে মেরুকরণ মাইক্রোস্কোপিক গবেষণা পদ্ধতি অসংলগ্ন বৈশিষ্ট্যযুক্ত বস্তু অধ্যয়ন করা সম্ভব করে তোলে। আইসোট্রপিক কাঠামোতে, আলোর প্রচারের গতি নির্বাচিত সমতলের উপর নির্ভর করে না। এই ক্ষেত্রে, অ্যানিসোট্রপিক সিস্টেমে, বেগ অনুযায়ী পরিবর্তন হয়বস্তুর অনুপ্রস্থ বা অনুদৈর্ঘ্য অক্ষ বরাবর আলোর নির্দেশিকা। যদি কাঠামো বরাবর প্রতিসরণের মাত্রা ট্রান্সভার্সের চেয়ে বেশি হয়, তাহলে ডবল ধনাত্মক প্রতিসরণ তৈরি হয়। এটি অনেক জৈবিক বস্তুর বৈশিষ্ট্য যেগুলির একটি কঠোর আণবিক অভিযোজন রয়েছে। তারা সব anisotropic হয়. এই বিভাগে, বিশেষ করে, মায়োফাইব্রিলস, নিউরোফাইব্রিল, সিলিয়াটেড এপিথেলিয়ামের সিলিয়া, কোলাজেন ফাইবার এবং অন্যান্য অন্তর্ভুক্ত।
পোলারাইজেশন মান
রশ্মির প্রতিসরণ এবং বস্তুর অ্যানিসোট্রপি সূচকের প্রকৃতির তুলনা কাঠামোর আণবিক সংস্থার মূল্যায়ন করা সম্ভব করে। মেরুকরণ পদ্ধতি বিশ্লেষণের হিস্টোলজিকাল পদ্ধতিগুলির মধ্যে একটি হিসাবে কাজ করে, সাইটোলজি ইত্যাদিতে ব্যবহৃত হয়। আলোতে শুধুমাত্র রঙিন বস্তুই অধ্যয়ন করা যায় না। মেরুকরণ পদ্ধতিটি অস্থির এবং অনির্দিষ্ট - নেটিভ - টিস্যু বিভাগের প্রস্তুতি অধ্যয়ন করা সম্ভব করে৷
আলোকিত কৌশল
এগুলি বর্ণালীর নীল-বেগুনি অংশে বা অতিবেগুনী রশ্মিতে আভা দেওয়ার জন্য কিছু বস্তুর বৈশিষ্ট্যের উপর ভিত্তি করে। অনেক পদার্থ, যেমন প্রোটিন, কিছু ভিটামিন, কোএনজাইম, ওষুধ, প্রাথমিক (অভ্যন্তরীণ) লুমিনেসেন্স দ্বারা সমৃদ্ধ। ফ্লুরোক্রোম, বিশেষ রঞ্জক যোগ করা হলে অন্যান্য বস্তু জ্বলতে শুরু করে। এই সংযোজনগুলি বেছে বেছে বা বিচ্ছিন্নভাবে পৃথক সেলুলার কাঠামো বা রাসায়নিক যৌগগুলিতে ছড়িয়ে পড়ে। এই সম্পত্তি হিস্টোকেমিক্যাল এবং জন্য luminescence মাইক্রোস্কোপি ব্যবহারের জন্য ভিত্তি তৈরিসাইটোলজিক্যাল স্টাডিজ।
ব্যবহারের এলাকা
ইমিউনো-ফ্লুরোসেন্স ব্যবহার করে, বিশেষজ্ঞরা ভাইরাল অ্যান্টিজেন সনাক্ত করেন এবং তাদের ঘনত্ব নির্ধারণ করেন, ভাইরাস, অ্যান্টিবডি এবং অ্যান্টিজেন, হরমোন, বিভিন্ন বিপাকীয় পণ্য ইত্যাদি সনাক্ত করেন। এই বিষয়ে, হারপিস, মাম্পস, ভাইরাল হেপাটাইটিস, ইনফ্লুয়েঞ্জা এবং অন্যান্য সংক্রমণের নির্ণয়ের ক্ষেত্রে, উপাদানগুলি পরীক্ষা করার জন্য লুমিনসেন্ট পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়। মাইক্রোস্কোপিক ইমিউনোফ্লোরোসেন্স পদ্ধতি ম্যালিগন্যান্ট টিউমার সনাক্ত করা, হার্ট অ্যাটাকের প্রাথমিক পর্যায়ে হার্টের ইস্কেমিক এলাকা নির্ধারণ করা ইত্যাদি সম্ভব করে তোলে।
আল্ট্রাভায়োলেট লাইট ব্যবহার করা
এটি একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের অতিবেগুনী রশ্মি শোষণ করার জন্য জীবিত কোষ, অণুজীব বা স্থির, কিন্তু বর্ণহীন, দৃশ্যমান-আলো-স্বচ্ছ টিস্যুতে অন্তর্ভুক্ত বেশ কয়েকটি পদার্থের ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে। এটি সাধারণত, বিশেষত, ম্যাক্রোমোলিকুলার যৌগগুলির জন্য। এর মধ্যে রয়েছে প্রোটিন, অ্যারোমেটিক অ্যাসিড (মিথিল্যালানিন, ট্রিপটোফান, টাইরোসিন ইত্যাদি), নিউক্লিক অ্যাসিড, পিরামিডাল এবং পিউরিন বেস ইত্যাদি। আল্ট্রাভায়োলেট মাইক্রোস্কোপি এই যৌগগুলির স্থানীয়করণ এবং পরিমাণ স্পষ্ট করা সম্ভব করে তোলে। জীবিত বস্তু অধ্যয়ন করার সময়, বিশেষজ্ঞরা তাদের জীবন প্রক্রিয়ার পরিবর্তনগুলি পর্যবেক্ষণ করতে পারেন৷
অতিরিক্ত
ইনফ্রারেড মাইক্রোস্কোপি আলো এবং অতিবেগুনী রশ্মি শোষণ করে অস্বচ্ছ বস্তু অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়প্রবাহ কাঠামো, যার তরঙ্গদৈর্ঘ্য 750-1200 এনএম। এই পদ্ধতিটি প্রয়োগ করার জন্য, প্রাথমিকভাবে রাসায়নিক চিকিত্সার প্রস্তুতিগুলি প্রকাশ করার প্রয়োজন নেই। একটি নিয়ম হিসাবে, ইনফ্রারেড পদ্ধতিটি নৃবিজ্ঞান, প্রাণীবিদ্যা এবং অন্যান্য জৈবিক ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়। ওষুধের জন্য, এই পদ্ধতিটি প্রধানত চক্ষুবিদ্যা এবং নিউরোমরফোলজিতে ব্যবহৃত হয়। ভলিউম্যাট্রিক বস্তুর অধ্যয়ন স্টেরিওস্কোপিক মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে বাহিত হয়। সরঞ্জামের নকশা আপনাকে বিভিন্ন কোণে বাম এবং ডান চোখ দিয়ে পর্যবেক্ষণ করতে দেয়। অস্বচ্ছ বস্তুগুলি তুলনামূলকভাবে কম বিবর্ধনে পরীক্ষা করা হয় (120 বারের বেশি নয়)। স্টেরিওস্কোপিক পদ্ধতিগুলি মাইক্রোসার্জারি, প্যাথমরফোলজি এবং ফরেনসিক মেডিসিনে ব্যবহৃত হয়৷
ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি
এটি ম্যাক্রোমলিকুলার এবং উপকোষীয় স্তরে কোষ এবং টিস্যুর গঠন অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়। ইলেকট্রন মাইক্রোস্কোপি গবেষণার ক্ষেত্রে একটি গুণগত উল্লম্ফন করা সম্ভব করেছে। এই পদ্ধতিটি জৈব রসায়ন, অনকোলজি, ভাইরোলজি, অঙ্গসংস্থানবিদ্যা, ইমিউনোলজি, জেনেটিক্স এবং অন্যান্য শিল্পে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। ইলেক্ট্রোম্যাগনেটিক ফিল্ডের মাধ্যমে ভ্যাকুয়ামে পাস করা ইলেকট্রনের প্রবাহ দ্বারা সরঞ্জামের রেজোলিউশনে একটি উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি প্রদান করা হয়। পরেরটি, ঘুরে, বিশেষ লেন্স দ্বারা তৈরি করা হয়। ইলেক্ট্রনগুলির একটি বস্তুর কাঠামোর মধ্য দিয়ে যাওয়ার বা বিভিন্ন কোণে বিচ্যুতি সহ তাদের থেকে প্রতিফলিত হওয়ার ক্ষমতা রয়েছে। ফলস্বরূপ, যন্ত্রের উজ্জ্বল পর্দায় একটি প্রদর্শন তৈরি হয়। ট্রান্সমিশন মাইক্রোস্কোপির সাহায্যে, একটি প্ল্যানার ইমেজ পাওয়া যায়, যথাক্রমে, একটি ভলিউমেট্রিক একটি স্ক্যানিং সহ।
প্রয়োজনীয় শর্ত
এটা লক্ষণীয় যে ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপিক পরীক্ষা করার আগে, বস্তুটি বিশেষ প্রস্তুতির মধ্য দিয়ে যায়। বিশেষ করে, টিস্যু এবং জীবের শারীরিক বা রাসায়নিক স্থিরকরণ ব্যবহার করা হয়। বিভাগীয় এবং বায়োপসি উপাদান, এছাড়াও, ডিহাইড্রেটেড, ইপোক্সি রেজিনে এম্বেড করা হয়, হীরা বা কাচের ছুরি দিয়ে আলট্রাথিন বিভাগে কাটা হয়। তারপর তারা বিপরীত এবং অধ্যয়ন করা হয়. একটি স্ক্যানিং মাইক্রোস্কোপে, বস্তুর পৃষ্ঠতল পরীক্ষা করা হয়। এটি করার জন্য, তাদের একটি ভ্যাকুয়াম চেম্বারে বিশেষ পদার্থ দিয়ে স্প্রে করা হয়।
