ব্যাকটেরিয়া সংক্রমণের বিভিন্ন ধরণের রোগজীবাণু এবং এর প্রজাতির সংজ্ঞার একটি পরিষ্কার সনাক্তকরণ প্রয়োজন। অণুজীবের ধরন নির্ধারণ করতে, মাইক্রোবায়োলজিস্টরা এর টিঙ্কোরিয়াল বৈশিষ্ট্যগুলি দ্বারা সাহায্য করা হয় - বিভিন্ন রঞ্জক দিয়ে দাগের জন্য জীবাণুর সংবেদনশীলতা। এই পদ্ধতিটি আপনাকে প্যাথোজেনের আকারবিদ্যা অন্বেষণ করতে দেয়। জীবাণুবিজ্ঞানের ক্ষেত্রে ব্যবহারিক এবং তাত্ত্বিক গবেষণার জন্য ব্যাকটেরিয়ার টিঙ্কোরিয়াল বৈশিষ্ট্যগুলি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ৷
অণুজীব গবেষণা
ব্যাকটিরিওলজিতে, অণুজীবকে দাগ দেওয়ার জন্য অনেক পদ্ধতি রয়েছে। এগুলি সবই ব্যাকটেরিয়ার টিঙ্কোরিয়াল বৈশিষ্ট্যের উপর ভিত্তি করে। স্টেনিং আপনাকে তাদের আকৃতি, গঠন, আকার, আপেক্ষিক অবস্থান নির্ধারণ করতে দেয়। এটি সাধারণ জীববিজ্ঞান এবং তুলনামূলক মাইক্রোবায়োলজির অণুজীবের প্রকারগুলিকে পদ্ধতিগত করার সমস্যাগুলি সমাধান করতে দেয়৷
এগুলি কেন আঁকা
ব্যাকটেরিয়া কার্যতস্বচ্ছ জীব, এবং স্টেনিং ব্যবহার ব্যতীত, তারা প্রচলিত মাইক্রোস্কোপির জন্য খারাপভাবে দৃশ্যমান। আপনি বস্তু অধ্যয়ন করতে বিশেষ ধরনের মাইক্রোস্কোপি (ফেজ কনট্রাস্ট, অন্ধকার ক্ষেত্র) ব্যবহার করতে পারেন, তবে সবচেয়ে সহজ উপায় হল দাগ দেওয়া, তারপরে ব্যাকটেরিয়াগুলি একটি প্রচলিত হালকা মাইক্রোস্কোপে দৃশ্যমান হয়৷
নমুনা প্রস্তুতি
স্টেনিং কৌশল ব্যবহার করা যাই হোক না কেন, অধ্যয়নের অধীনে বস্তুটি প্রস্তুত করার জন্য অভিন্ন নিয়ম রয়েছে। নিম্নলিখিত ধাপগুলি বাধ্যতামূলক:
- জীবাণুমুক্ত যন্ত্রগুলি একটি কাচের স্লাইডে একটি দাগ তৈরি করে৷
- নমুনা শুকানো হচ্ছে। এটি ঘরের তাপমাত্রায় বা শুকানোর ক্যাবিনেট ব্যবহার করে করা হয়৷
- নির্ধারণ পর্যায় দ্বারা অনুসরণ করা হয় - অণুজীবগুলি বিশেষ যৌগগুলির সাথে কাচের সাথে সংযুক্ত থাকে৷
- যথাযথ দাগ - নমুনাটি একটি নির্দিষ্ট সময়ের জন্য রঞ্জক দ্বারা আবৃত থাকে, তারপরে এটি ধুয়ে ফেলা হয়।
- চূড়ান্ত শুকানো - নমুনা আবার শুকানো হয়।
সবচেয়ে সাধারণ রং
সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত রঞ্জকগুলি বিভিন্ন অ্যাসিড মান (পিএইচ) সহ অ্যানিলিনের উপর ভিত্তি করে। বেশিরভাগ রঞ্জক পাউডার যা অ্যালকোহলে মিশ্রিত হয়।
যে রঞ্জকগুলির মধ্যে ক্যাশনগুলি রঙের এজেন্টগুলিকে মৌলিক (7-এর চেয়ে বেশি pH) বলা হয়। এগুলি লাল (ম্যাজেন্টা, সাফরানিন), বেগুনি (মিথাইল ভায়োলেট, থায়োনিন), নীল (মিথিলিন নীল), সবুজ (ম্যালাকাইট সবুজ), বাদামী (ক্রাইসয়েডিন) এবং কালো (ইন্ডুলিন) রঙে অণুজীবকে দাগ দিতে ব্যবহার করা যেতে পারে।
রঞ্জক, যে রঙের এজেন্ট অ্যানয়ন হয়, তাকে অম্লীয় (pH 7-এর কম) বলে। তারা নমুনাটিকে লাল (ইওসিন), হলুদ (পিক্রিন) বা কালো (নিগ্রোসিন) দাগ দেবে।
এখানে একদল নিরপেক্ষ রঞ্জক (উদাহরণস্বরূপ, রোডামাইন বি), যেখানে ক্যাটেশন এবং অ্যানিয়ন উভয়ই রঙের এজেন্ট হিসেবে কাজ করে।
সংস্কৃতি মৃত বা জীবিত
পরীক্ষার নমুনার জীবন রূপ অনুসারে দাগ দেওয়ার পদ্ধতি দুটি ভাগে বিভক্ত।
- অত্যাবশ্যক (জীবনকাল) দাগ। অণুজীবের বৈশিষ্ট্য অধ্যয়নের এই পদ্ধতিটি জীবন্ত টিস্যুগুলির অধ্যয়নে ব্যবহৃত হয়, যা জীবাণুর গুরুত্বপূর্ণ প্রক্রিয়াগুলি পর্যবেক্ষণ করা সম্ভব করে তোলে। এই দাগের জন্য, কম বিষাক্ততা এবং উচ্চ অনুপ্রবেশ ক্ষমতা সহ রং ব্যবহার করা হয়।
- পোস্ট-অত্যাবশ্যক দাগ। এটি মৃত বা নিহত অণুজীবের দাগ। ব্যাকটেরিয়ার টিঙ্কোরিয়াল বৈশিষ্ট্যের জন্য ধন্যবাদ, মাইক্রোবায়োলজিস্টরা তাদের গঠন নির্ধারণ করে। এই দাগটিই সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়৷
গ্রাম-পজিটিভ এবং গ্রাম-নেতিবাচক
এটি ব্যাকটেরিয়ার বৈশিষ্ট্য যা বিভিন্ন ওষুধের নির্দেশাবলীতে পাওয়া যায়। ব্যাকটেরিয়ার টিঙ্কোরিয়াল বৈশিষ্ট্য অধ্যয়ন করার এই পদ্ধতিটি জেন্টিয়ান ভায়োলেট ডাই এবং আয়োডিন ফিক্সেশন ব্যবহারের উপর ভিত্তি করে। এটি হ্যান্স ক্রিশ্চিয়ান গ্রাম এর কৌশল, একজন ডেনিশ চিকিত্সক যিনি এটি 1884 সালে প্রস্তাব করেছিলেন। এই দাগের ফলে, ব্যাকটেরিয়া দুটি গ্রুপে বিভক্ত:
- গ্রাম (+) - নীল হয়ে যায়(staphylococci এবং streptococci)।
- গ্রাম (-)- গোলাপী থেকে লাল দাগ (এন্টারোব্যাকটেরিয়া, সালমোনেলা, ই. কোলি)।
ব্যাকটেরিয়াল দেয়ালের বিভিন্ন টিঙ্কোরিয়াল বৈশিষ্ট্যের কারণে বিভিন্ন দাগের ফলাফল হয়। গ্রাম দাগ পদ্ধতি এখনও কিছু সংক্রামক রোগ নির্ণয়ের প্রধান পদ্ধতি।
অন্যান্য দাগ দেওয়ার কৌশল
আসুন ব্যাকটিরিওলজিতে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত আরও কয়েকটি পদ্ধতির বৈশিষ্ট্য দেখা যাক।
- Ziehl-Nelson পদ্ধতি - ব্যাকটেরিয়ার অ্যাসিড প্রতিরোধ ক্ষমতা নির্ধারণ করে। এটি যক্ষ্মা এবং মাইকোব্যাকটেরিওসিসের কার্যকারক এজেন্ট চিহ্নিত করে৷
- রোমানভস্কি-গিমসা কৌশল - অ্যাসিডোফিলিক (এসিটিক অ্যাসিড এবং ল্যাকটিক অ্যাসিড) ব্যাকটেরিয়াকে লাল এবং বেসোফিলিক (স্পিরোকেটস এবং প্রোটোজোয়া) নীলকে দাগ দেয়৷
- মরোজভের কৌশল - ব্যাকটেরিয়াকে বাদামি করে এবং তাদের ফ্ল্যাজেলাকে দৃশ্যমান করে।
স্পোর দেখা যায়
Tsiel এর ফুচসিনের দাগ আপনাকে ব্যাকটেরিয়া স্পোর দেখতে দেয়। দাগ পরে একটি গোলাপী রঙ থাকার, তারা নীল ব্যাকটেরিয়া পটভূমি বিরুদ্ধে স্পষ্টভাবে দৃশ্যমান হয়। এই পদ্ধতিটিও ব্যাকটিরিওলজির একটি হাতিয়ার এবং এটি অত্যন্ত ব্যবহারিক গুরুত্বের।
